生物制品是制藥工業(yè)的一部分，對生產廠房有很高的潔凈要求，尤其是活jun、活疫苗的生產中，經常受到不同程度的污染，因此，不僅需要重視潔凈室的建立，更要重視質量控制方法及標準。

朝鮮戰(zhàn)爭中，美國發(fā)現大量電子儀器失靈，后找到了主要原因，是灰塵在作怪，促成了潔 凈技術的起步。1961年，誕生了世界上早的潔凈室標準，1966年，頒布了修訂后209A， 時至1992年，建立了迄今被廣泛采用的209E。上為了加強藥品、生物制品質量管理規(guī)范 (GMP)，把潔凈室定為的生產硬件之一。GMP對廠房、設備等，明確規(guī)定了相應的潔凈要 求，并制訂了有關標準。

1　潔凈室的污染源

潔凈室污染源按性質可分物理、化學、生物等。直徑在0.001-1000μm的固態(tài)、液態(tài)或二者的混合物質，包括生物粒子和非生物粒子，我們稱為懸浮粒子。微生物一般以無生命的粒子作載體而懸浮，以氣溶膠形式存在于空氣中，1μm以下者永外懸浮，10μm以上者會逐漸沉下來而形成菌塵。潔凈室污染可分為外部污染和內部污染。外部污染指大氣塵污染，可以通過光電法測得。內部污染，是由人和有關的物品、設備 等引起的。人是潔凈室大的污染源，占90%左右。人和環(huán)境造成了潔凈室的污染，所以在潔凈室中，人的數量和活動應有特別嚴格的限制。　　

2　潔凈室質控標準

表1　世界主要國家潔凈室標準(潔凈度)

潔凈室是指空氣潔凈度達到規(guī)定要求的可供人類工作的場所 ，其功能是控制微粒的污染 。一般按用途可分為：1.工業(yè)潔凈室，以無生命的微粒為控制對象;2.生物潔凈室，主要控制微生物對工作對象的污染。

3　潔凈室質控的檢測方法及討論[8]

3.1　塵埃粒子　由于空氣中存在大量塵埃粒子，而微生物大多依附于這些塵埃粒子隨空氣流動造成污染。制 藥工業(yè)用多種方法獲得無菌狀態(tài)，過濾法以其捕集率高，又經濟而被廣泛使用。其中，特別應該提到的是采用了HEPA(High Eicienoy Particulate Air)過濾器，對0.3μm以上空氣粒子捕集率高達99.97%以上，除濾過病du外，空氣中所有微生物顆?？杀粸V除。因此， 正常潔凈室是無菌的，但是，由于人、物、環(huán)境等污染因素，潔凈室往往受到不同程度 污染。因此，我們多采用激光塵埃粒子計數且進行監(jiān)控。標準見表2。

表2　外有關懸浮粒子的測定標準(塵粒數/m3)

3.2　空氣微生物　空氣中活微生物大多依附塵埃粒子而形成生物活性粒子。應用細菌采樣器抽取一定量的空氣 使其滯留在培養(yǎng)基上，經過培養(yǎng)計數菌落數。20世紀30年代，英國研制porton液體采樣器，美 國研制了AGI液體采樣器。1941年，Bourdion使用裂縫式采樣器，成為空氣微生物采樣測定的開端。1956年，報道了六級篩孔撞擊式采樣器，1958年A.A.Andersn對其加以改進并 定型生產，稱為安德森(Anderson)空氣微生物采樣器（蘇州宏瑞FSC-A6)。它由頂罩、6節(jié)篩板、3個彈簧及抽氣 孔和動力裝置構成。由于它采集粒譜廣 、效率高、生物失活率低等原因而廣泛使用至今。空氣微生物采樣器一般分為七大類：液體式、固體式、沉降式、離心式、光散射式和大容量式。本文將對離心式空氣微生物采樣器(R CS)作詳細討論。空氣微生物測試標準見表3。

表3　外有關空氣微生物的測定標準(CFU/m3)

3.3　表面微生物　為了檢測潔凈室中墻壁、地板、儀器表面、桌面、門把等帶菌情況，通常選用接觸壓印法(Cortact)和棉拭法(Swabbing)等方法。需要時 ，還可與過濾裝置相結合來完成棉拭采樣。1941年，Walter和Hvcker報道了COntact瓊脂平板方法，以后，Angelotti和Fotert等作了進一步的工作。帶菌狀況都有要求，歐共體GMP( 草案)規(guī)定，100級：平均菌落數不可過5 個;1000級：25個;100000級：50個。表面微生物的檢測，越來越受到人們的重視。

3.4　關于沉降平皿(Settle plate)　1881年Kock創(chuàng)立。依靠空氣中的粒子自然沉降于瓊脂平板上的這種采集方法，由于粒子沉降 的速率很慢，如需采集到有效數量的粒子，就需暴露很長時間。但因空氣中的致bing菌數量是很少的，金黃色菌菌球jun在醫(yī)院病房空氣中平均每140升才有一個活菌粒子，為了彌補這個缺陷，曾采用直徑為14公分的大平皿，以增加瓊脂的暴lu面積。Harding和Williams還曾用 一種多層平板的方法來進一步暴露面積，每層放一個14公分直徑的平板，但結果不堪滿意。

由于潔凈室已濾除了大部分大顆粒，一般用此法是無意義的。但是，人為、環(huán)境和潔凈裝置 故障等原因引起的較大顆粒污染以及沉降平板采樣潔的簡便，可作為日常監(jiān)測潔凈室水平的 一種參考方法。

3.5　關于RCS[9]　離心式空氣采樣器被介紹作為一種在醫(yī)院使用的檢 測空氣微生物的儀器，由于它輕便，無噪音而廣泛使用，并擴展到制藥工業(yè)等領域。RCS通 過離心收集顆粒，為制藥工業(yè)所接受，因為它似乎符合FDA所描述的“Active”采樣儀器。Gre-schel等認為它相當有效，Macher等則持反對意見。多年來，許多者了帶菌顆粒的大小，結論是：5-15μm，中等粒是13μm，而4μm以下很少。這些結果是從醫(yī)院、手shu室、辦公室、實驗室和制藥無菌室所獲得。他們認為，如果顆粒大小是已知的，RCS可定 量測定細jun濃度，但是，目前這些顆粒大小是未知的，故不能把它視為定量采樣器，只能歸于沉降平皿一樣的類型。